半岛(中国)体育·官方网站《食品科学》：湘潭大学欧阳秋丽副教授等：反式-2-己烯

　　柑橘酸腐病菌（Geotrichum citri-aurantii）侵染引起的酸腐病是最严重的柑橘果实采后病害之一。目前，已注册的商用杀菌剂仅有邻苯基苯酚钠盐、双胍盐和丙环唑可部分防治酸腐病，但这些传统杀菌剂存在化学毒性，极易污染环境，且易导致柑橘果实 油斑病暴发等问题。多项研究表明，植物精油及其抑菌组分对酸腐病菌等多种柑橘采后致病真菌有显著的抑制作用，且具有安全、高效、低残留等优点，具备控制酸腐病害的潜力。反式-2-己烯醛天然存在于香茅油、樟脑油等中，是植物精油的挥发性组分，也是植物对外界环境应答防御的重要信号分子。研究表明，反式-2-己烯醛对链格孢菌、圆弧青霉、扩展青霉、灰葡萄孢菌等多种采后致病菌有良好的抑制效果。可溶性盐主要通过破坏真菌细胞壁和细胞膜、破坏重要酶系统的作用和干扰能量传递以及遗传机制，从而干扰真菌的正常生长。

　　湘潭大学化工学院的欧阳秋丽，吴垚焱冰，刘洋梅等*通过体外和体内实验探讨反式-2-己烯醛与可溶性盐联用对柑橘酸腐病菌的抑制作用及对酸腐病的防控效果，以期为柑橘贮藏期病害的可持续治理提供理论依据。

　　由表1可知，双乙酸钠对柑橘酸腐病菌菌丝体的抑制作用随着质量浓度增加而增强。在整个培养时间内，质量浓度低于4.00 mg/mL的双乙酸钠对柑橘酸腐病菌菌丝体的抑制率低于30%，效果不佳；当双乙酸钠质量浓度达到16.00 mg/mL，柑橘酸腐病菌生长被完全抑制，说明双乙酸钠对柑橘酸腐病菌的MIC和MFC均为16.00 mg/mL。

　　由表2可知，随着作用质量浓度的增加，磷酸钠对柑橘酸腐病菌的抑制作用逐渐增强。在整个培养时间内，低质量浓度（1.00～2.00 mg/mL）的磷酸钠对柑橘酸腐病菌菌丝体的生长抑制效果随着培养时间延长而效果减弱半岛(中国)体育·官方网站。培养2 d时，4.00 mg/mL的磷酸钠可完全抑制柑橘酸腐病菌生长；培养4 d时，16.00 mg/mL的磷酸钠可完全抑制柑橘酸腐病菌生长，说明磷酸钠对柑橘酸腐病菌的MIC和MFC分别为4.00 mg/mL和16.00 mg/mL。

　　由 表3可知，在整个培养过程内，1.00～16.00 mg/mL的丙酸钙对柑橘酸腐病菌的抑制 作用较弱。 当处理质量浓度达到16.00 mg/mL时，对柑橘酸腐病菌生长的抑制率仅为50.00%～66.28%，说明丙酸钙抑制柑橘酸腐病菌生长的MIC和MFC均高于16.00 mg/mL。

　　如表4所示，反式-2-己烯醛与磷酸钠、双乙酸钠和丙酸钙联用为协同作用（FIC≤0.5），与脱氢乙酸钠联用为相加作用（0.5＜FIC≤1）半岛(中国)体育·官方网站，与单独使用相比，复合使用时反式-2-己烯醛和可溶性盐的使用量均明显降低。反式-2-己烯醛和双乙酸钠联用后半岛(中国)体育·官方网站，抑制柑橘酸腐病菌生长的MIC＝MFC＝0.23 mg/mL，反式-2-己烯醛和双乙酸钠的用量明显低于单独抑菌时的质量浓度，相较于单独使用时的MIC和MFC，反式-2-己烯醛质量浓度为0.11 mg/mL，双乙酸钠质量浓度为0.12 mg/mL，表明双乙酸钠与反式-2-己烯醛联用后，反式-2-己烯醛的用量减少73.81%～87.06%，双乙酸钠的用量减少99.25%。反式-2-己烯醛与磷酸钠联用显著抑制柑橘酸腐病菌生长（MIC＝MFC＝0.23 mg/mL），此时反式-2-己烯醛和磷酸钠的质量浓度分别为0.11 mg/mL和0.12 mg/mL，相比于单独使用时的MIC和MFC，磷酸钠和反式-2-己烯醛质量浓度分别降低97.00%～99.25%和73.81%～87.06%。反式-2-己烯醛与丙酸钙联用之后MIC＝MFC＝0.23 mg/mL，反式-2-己烯醛用量相比于单独处理时的MIC和MFC减少73.81%～87.06%，丙酸钙质量浓度为0.12 mg/mL，明显低于丙酸钙单独作用时的质量浓度。反式-2-己烯醛和脱氢乙酸钠联用同样可降低物质的单独用量，对酸腐病菌的MIC＝MFC＝0.46 mg/mL（反式-2-己烯醛质量浓度为0.21 mg/mL，脱氢乙酸钠质量浓度为0.25 mg/mL），相比单独使用时的MIC和MFC，反式-2-己烯醛和脱氢乙酸钠分别减少了50.00%～75.29%和68.75%的用量。由以上结果可知，反式-2-己烯醛与可溶性盐联用可大幅增强二者的抑菌效果。

　　经反式-2-己烯醛联用可溶性盐处理后，接种柑橘酸腐病菌的果实发病率和病斑直径变化分别如表5、6和图1所示。贮藏3 d时，对照组果实开始发病，发病率为（36.67±5.77）%，病斑直径为（4.3±0.6）mm，处理组中，反式-2-己烯醛＋丙酸钙处理组开始发病，但发病率和病斑直径均显著低于对照组（ P ＜0.05）。贮藏4 d时，对照组发病率达到90%，病斑直径扩大至（14.9±0.3）mm。反式-2-己烯醛＋磷酸钙处理组在4 d时开始发病，在所有已发病的处理组中，1×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸钙处理组发病率最高（50.00%），病斑直径（（7.8±0.9）mm）显著低于对照组。贮藏5 d时，反式-2-己烯醛＋双乙酸钠处理组开始发病，处理组中1×MFC和10×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸钙发病率最高，分别为（84.07±11.42）%和（86.67±5.77）%，病斑直径分别为（23.2±4.7）mm和（25.1±2.4）mm，发病率与对照组无显著性差异，但病斑直径显著低于对照组。贮藏6 d时，对照组和1×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸钙处理组发病率达到1 0 0%，病斑直径分别是（60.6±5.3）mm和（55.6±9.7）mm，除反式-2-己烯醛＋丙酸钙处理组外，其他联用处理组发病率以及病斑直径均显著低于对照组，其中5×MFC和10×MFC反式-2-己烯醛＋脱氢乙酸钠处理组椪柑果实均未发病。

　　此研究结果表明，双乙酸钠、丙酸钙、磷酸钠对柑橘酸腐病菌有一定的抑制效果，具有抑制柑橘采后酸腐病的潜力，其中磷酸钠对酸腐病菌的抑制效果最强。长期使用单一化学杀菌剂会使病菌产生抗药性，其杀菌作用会大大降低，因此将多种杀菌剂进行复合是目前防治柑橘酸腐病的一种手段。脱氢乙酸钠和硅酸钠按照质量比1∶4进行联用时可以协同抑制酸腐病菌菌丝体生长。双乙酸钠、丁酸钠、丙酸钙和山梨酸钾抑制黄曲霉的MFC分别为32、32、64 mg/mL和128 mg/mL；双乙酸钠与山梨酸钾（质量比为2∶1）联用后对黄曲霉的MFC仅为1 mg/mL，盐类物质的使用量大大减少。离体实验时，可溶性盐单独作用酸腐病菌时抑菌效果较差，但与反式-2-己烯醛联用后其抑菌性能提高且抑菌物质用量降低。反式-2-己烯醛与脱氢乙酸钠复合为相加作用，反式-2-己烯醛＋双乙酸钠、反式-2-己烯醛＋磷酸钠、反式-2-己烯醛＋丙酸钙为协同作用，其中反式-2-己烯醛与双乙酸钠、丙酸钙的联用效果优于其他两种可溶性盐。反式-2-己烯醛和盐类杀菌剂联用后半岛(中国)体育·官方网站《食品科学》：湘潭大学欧阳秋丽副教授等：反式-2-己烯醛与可溶性盐联用对柑橘酸腐病菌和酸腐病的抑制作用，对酸腐病菌的抑菌效果强于单独杀菌剂作用，推测盐类溶于水后会造成细胞膜两侧渗透压不同，影响细胞膜通透性，加速反式-2-己烯醛进入细胞，加剧细胞损伤。

　　将肉桂醛和柠檬醛按照1∶2（体积比）的比例混合，用1×MFC混合物处理柑橘果实时，贮藏8 d后的腐烂率仅为60%，而对照组果实已经全部腐烂。百里香精油和不同质量分数的碳酸钠溶液联用，发现1 600 μL/L百里香精油和质量分数0.5%碳酸钠混合可以完全抑制柑橘酸腐病害的发生。与反式-2-己烯醛单独处理相比，5×MFC和10×MFC 反式-2-己烯醛＋脱氢乙酸钠对柑橘酸腐病均有显著的抑制作用，处理组第6天时的果实未发病；10×MFC反式-2-己烯醛＋磷酸钠效果较好，第6天时发病率为（32.78±12.51）%。实验所用的反式-2-己烯醛有效质量浓度远高于离体实验的有效质量浓度，可能由于实验所用空间较大，反式-2-己烯醛挥发得更快导致有效浓度降低。

　　综上，反式-2-己烯醛与双乙酸钠、磷酸钠、脱氢乙酸钠联用能够显著抑制酸腐病菌菌丝体生长，降低使用量，并有效控制柑橘采后酸腐病。其中，5×MFC和10×MFC 反式-2-己烯醛＋脱氢乙酸钠防控效果最佳。